期刊简介
本刊属医学学术刊物。主要反映该院中西医药等各个学科的教学、科研、临床新成果，报道各种学术活动，以促进长春中医药大学与各院校之间的交流和医疗卫生事业的发展。
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- 杂志名称：长春中医药大学学报杂志
- 主管单位：吉林省教育厅
- 主办单位：长春中医药大学
- 国际刊号：1007-4813
- 国内刊号：22-1375/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏
非放射性EMSA法检测AP-1蛋白DNA结合活性实验优化
房军帆；杜俊英；梁宜；方剑乔
关键词：凝胶电泳迁移率(EMSA), AP-1, 凝胶电泳, 实验优化
摘要：目的 探索一种方案简便,仪器要求较低,且有效的非放射性凝胶电泳迁移率(EMSA)的检测方法.方法 以AP-1蛋白为实验对象,自制退火缓冲液合成生物素标记AP-1探针,抽提炎症大鼠脊髓背角处核蛋白(无需纯化),取10μg核蛋白与探针室温反应30 min.小型聚丙烯酰胺非变性凝胶电泳后将探针湿转至正电子加强尼龙膜上,紫外交联,ECL显影.通过正常探针与变性探针的竞争实验,证明方法的可靠性.结果 自制退火缓冲液成功合成生物素标记AP-1探针;炎症大鼠脊髓背角处AP-1蛋白与正常探针的结合后产生明显滞后条带,且结合力远高于变异探针.结论 优化后的非放射性EMSA方案,有效降低了实验花费和仪器要求,且结果可信.
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